人胃癌肿瘤相关成纤维细胞的原代培养和鉴定
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【作 者】:
【摘 要】目的探讨人胃癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)的培养和鉴定方法,并分析其与胃正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)在生物学特性和蛋白表达方面的差异,为其功能研究奠定基础。方法采用组织块法和酶消化法进行人胃癌CAFs和NFs的原代培养,通过酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察和多种蛋白的免疫细胞化学染色对其进行鉴定。结果获得纯化的人胃癌CAFs和NFs。胃癌CAFs呈长梭形,大小不等,生长密集,排列紊乱。除表达vimen-tin这一成纤维细胞的标记物外,还表达FAP、SMA,但不表达CK、desmin。结论只要给细胞创造良好的生长条件并规范操作,组织块法和消化法均可成功的培养出人胃癌CAFs和人胃NFs。胃癌CAFs与NFs在形态结构、生长方式和蛋白表达等方面均存在明显差异。
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