【出 处】：

【作 者】：

【摘 要】目的探讨Beclin1在食管鳞状细胞癌（esophagussquamouscellcarcinoma，ESCC）中的表达及意义，分析其过表达对人ESCC细胞株TE1体外生长活性的影响。方法分别采用免疫组化SP法和RT—PCR技术检测57例ESCC及癌旁正常食管黏膜组织中Beclin1蛋白及mRNA的表达；利用基因转染、RT—PCR及Westernblot法观察外源性Beclin1过表达对ESCC细胞株TEl的影响；MTT法分析外源性Beclin1过表达对TE1细胞增殖的影响；流式细胞仪（flowcytometry，FCM）检测转染后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡；在荧光显微镜下观察转染后肿瘤细胞的自噬。结果免疫组化染色结果示，在ESCC中Beclin1蛋白的阳性率为29．82％（17／57），明显低于癌旁正常食管黏膜组织100％（57／57）（P〈0．00），Beclin1蛋白的表达与ESCC患者的分化程度（x2=6．158，P=0．046）、淋巴结转移（x2=5．664，P=0．017）有关；与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度无关；RT—PCR检测结果示，在ESCC中BcclinlmRNA的表达量（0．168±0．038）明显低于癌旁正常食管黏膜组织（0．280±0．052）（P〈0．00）。pCMV6．Entry．Beclin1脂质体法转染TE1细胞后，在mRNA和蛋白水平Beclin1的表达均高于TE1PE组及TE1组。在TE1细胞中过表达Bedim后可抑制肿瘤细胞的体外生长，抑制率为57．21％。FCM检测pCMV6-Entry—Beclinl转染后G，期细胞明显增多，S期细胞明显减少，细胞增殖受到抑制；凋亡率为5．91％，高于TE1PE组和TE1组（P〈0．05）。在荧光显微镜下见TE1Beclinl组中MDC标记的自噬囊泡数量明显增加。结论自噬相关基因BeclinlmRNA及蛋白在ESCC中表达下调，自噬活性的降低可能与ESCC的发生、发展及侵袭转移有关；Beclin1过表达可抑制人ESCC细胞株TE1的增殖，并诱导其自噬和凋亡，利用自噬基因Beclin1对ESCC基因治疗也许具有可行性。