SOCS-3对OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响
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【作 者】:
【摘 要】目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白一3(suppressorsofcytokinesignaling,SOCS一3)对抑瘤素M(oncostatinM,OSM)诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),用Lipofeetamine2000分别转染pCR3.1/SOCS-3表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆,应用OSM(10ng/m1)进行刺激。培养48h后收集细胞及上清液,采用Westernblot检测SOCS-3、CK18、α—SMA和磷酸化信号传导及转录激活因子3(phospho.Signaltransducersandactivatorsoftranscription3,p-STAT3)的表达;采用酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中I型胶原(collagenI,ColI)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌;采用RT—PCR检测SOCS-3mRNA的表达。结果与对照组相比,OSM刺激组肾小管上皮细胞d—SMA和p-STAT3蛋白表达增加,细胞培养上清液ColI和FN的分泌增加,而CK18蛋白表达减少。SOCS-3过表达能抑制OSM刺激引起的仪一SMA和p-STAT3蛋白表达,减少ColI和FN的分泌,同时能够部分恢复OSM刺激引起的CK1l8蛋白表达。结论SOCS-3过表达能抑制OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化,此过程可能与p-STAT3的磷酸化受抑有关。
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