miR-129-5p靶向调控VCP抑制骨肉瘤细胞体外迁徙侵袭
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【摘 要】目的探讨miR-129-5p是否靶向调控VCP基因抑制骨肉瘤细胞迁徙侵袭。方法构建miR-129-5p过表达及低表达的慢病毒载体,转染骨肉瘤细胞U2-OS;采用实时荧光定量PCR检测上调及下调miR-129-5p的U2-OS细胞中miR-129-5p的表达量;采用RT-PCR和Western blot技术检测VCPmRNA和蛋白表达;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁徙、侵袭情况。结果实时荧光定量PCR结果显示U2-OS细胞中miR-129-5p表达被明显上调或下调;RT-PCR和Westernblot检测结果显示:miR-129-5p上调U2-OS细胞组中VCPmRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照细胞组(阴性慢病毒转染);miR-129-5p下调U2-OS细胞组中VCPmRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照细胞组;miR-129-5p上调U2-OS细胞迁徙和侵袭力显著低于阴性对照细胞,miR-129-5p下调的U2-OS细胞迁徙和侵袭力显著高于阴性对照细胞。结论miR-129-5p靶向调控VCP的表达而抑制骨肉瘤细胞迁徙和侵袭能力。
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